動(dòng)物臟器組織樣本結(jié)構(gòu)復(fù)雜，直接檢測(cè)容易因組織不均勻影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。通過研磨處理，可以充分破壞組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)容物釋放，提高樣品均一性，為DNA/RNA提取、蛋白分析以及毒理指標(biāo)檢測(cè)提供穩(wěn)定可靠的樣品基礎(chǔ)。
動(dòng)物組織樣本通常含有較多水分及活性成分，普通研磨容易產(chǎn)生熱量，導(dǎo)致樣品狀態(tài)變化。上海凈信JXCL-3K三維冷凍研磨儀采用低溫冷凍研磨方式，通過液氮環(huán)境降低樣品溫度，能夠使組織快速脆化，再進(jìn)行機(jī)械破碎，可以有效減少研磨過程中的溫升減少對(duì)樣品RNA、蛋白質(zhì)等成分的影響。同時(shí)，冷凍研磨設(shè)備支持多樣品處理，可提高實(shí)驗(yàn)效率和樣品處理一致性，滿足科研實(shí)驗(yàn)對(duì)穩(wěn)定性的需求。
三維冷凍研磨儀對(duì)組織樣品前處理研磨的實(shí)驗(yàn)操作流程
一、實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備（防RNA降解為核心）
1. 耗材預(yù)處理：使用無酶離心管、研磨珠，全程佩戴一次性手套口罩，操作臺(tái)擦拭RNase清除劑，杜絕外源核糖核酸酶污染。
2. 標(biāo)本處理：將動(dòng)物臟器、毒理組織樣本剪成小塊，投入液氮中冷凍鎖存核酸活性；將凍好樣本裝入無酶研磨管，加入適配規(guī)格氧化鋯研磨珠，注入TRIzol裂解液，擰緊管蓋密封。
3. 設(shè)備調(diào)試：開啟JXCL-3K三維冷凍研磨儀，設(shè)置腔體溫度預(yù)冷，等待設(shè)備溫度穩(wěn)定；整理耗材，備好液氮、低溫冰盒。
二、裝樣上機(jī)
1. 將裝好樣本的研磨管對(duì)稱放入設(shè)備適配器，嚴(yán)格配重配平，防止研磨震動(dòng)偏移損傷儀器。
2. 把適配器放入研磨腔體，閉合艙門并鎖緊卡扣，確認(rèn)腔體密閉。
三、設(shè)置儀器運(yùn)行的程序參數(shù)
1. 調(diào)取研磨程序：設(shè)置儀器運(yùn)行所需要應(yīng)用的振蕩頻率、單次研磨時(shí)長(zhǎng)、間歇制冷時(shí)間、重復(fù)循環(huán)研磨的次數(shù)；依靠三維立體振蕩充分粉碎堅(jiān)硬組織。
2. 啟動(dòng)設(shè)備運(yùn)行，全程低溫環(huán)境抑制內(nèi)源RNA酶分解核酸，最大程度地保留完整RNA。
四、研磨后核酸粗處理
1. 程序結(jié)束泄壓開蓋，取出研磨管置于冰面靜置幾分鐘，讓組織充分裂解。
2. 按照試劑標(biāo)準(zhǔn)流程，加入氯仿震蕩分層，低溫高速離心，吸取上層水相RNA溶液移入新無酶離心管。
五、純化收集與儀器收尾
1. 配合異丙醇沉淀、無酶乙醇洗滌、干燥重溶，完成RNA提純，分裝低溫保存。
2. 清空研磨腔體、適配器，使用純水擦拭清理殘?jiān)?，烘干存放設(shè)備，完成整套實(shí)驗(yàn)操作。
